Abstrak
Pemisahan fase protein–RNA merupakan inti dari kondensat biomolekuler tanpa membran yang mengatur fisiologi dan patologi sel. Dengan menggunakan model kondensasi protein–RNA virus yang merupakan pola dasar, kami menentukan urutan kejadian yang dimulai dengan pembentukan protomer dalam waktu kurang dari satu detik dengan dua RNA per dimer protein. Asosiasi molekul RNA tambahan ke situs pengikatan sekunder yang lebih lemah dalam protomer ini memulai perakitan kondensat molekuler yang menyerupai kristalisasi. Nukleasi primer lebih cepat daripada jumlah nukleasi sekunder dan pertumbuhan, yang merupakan proses multi langkah. Inti protein–RNA tumbuh selama ratusan detik menjadi filamen dan selanjutnya menjadi nanokluster dengan diameter sekitar 600 nm. Mikroskopi krioelektron mengungkapkan struktur internal yang dibentuk oleh lapisan-lapisan filamen protein–RNA yang masuk yang terbuat dari oligomer ribonukleoprotein, yang mengingatkan pada pengemasan genom nukleokapsid. Nanocluster ini berkembang menjadi tetesan kondensat cair yang mengalami koalesensi parsial lebih lanjut untuk menghasilkan koaservat protein-RNA mirip hidrogel yang mungkin mewakili perancah kondensat pabrik virus besar dalam sel yang terinfeksi. Investigasi kinetik eksperimental terpadu kami mengungkap langkah-langkah dan struktur pembatas laju di sepanjang jalur multilangkah biologis utama yang ada di seluruh kerajaan kehidupan.