ABSTRAK
Agen perangsang eritropoiesis (ESA) terus menjadi ancaman signifikan terhadap integritas olahraga manusia dan kuda. Selain pengujian langsung konvensional, pemantauan biomarker yang terkait dengan efek ESA dapat memberikan pendekatan pelengkap melalui deteksi tidak langsung untuk meningkatkan pengendalian doping. Dalam penelitian ini, kami menerapkan RNA-sequencing (RNA-seq) untuk menemukan biomarker RNA darah pada kuda Thoroughbred setelah pemberian bentuk eritropoietin manusia rekombinan (rhEPO) kerja panjang, metoksi polietilen glikol epoetin beta, Mircera®. Pemberian tunggal Mircera® subkutan pada ~ 4,2 μg/kg efektif dalam meningkatkan kadar hematokrit, hemoglobin, dan eritrosit ke berbagai tingkatan paling cepat 4 hari pasca-pemberian pada ketiga kuda, yang bertahan selama 40 hari pasca-pemberian (sampel terakhir yang dikumpulkan). RNA-seq diterapkan untuk menganalisis perubahan transkriptomik darah. Analisis ekspresi gen diferensial telah memungkinkan identifikasi 46 gen yang menunjukkan peningkatan dramatis dan sementara pada 4–11 hari setelah pemberian Mircera®. Analisis STRING telah mengidentifikasi pengayaan fungsional dari 15 gen yang penting untuk eritropoiesis dan fungsi eritrosit, yang mendukung gagasan tentang peningkatan pelepasan ke dalam sirkulasi perifer dari retikulosit yang mengandung RNA residual setelah paparan rhEPO, yang jika tidak akan matang secara normal di dalam sumsum tulang pada kuda. Pembelajaran mesin dari transkriptom darah telah memungkinkan diskriminasi sampel dengan atau tanpa pemberian Mircera. Oleh karena itu, penelitian kami telah memberikan wawasan baru ke dalam mekanisme biologis eritropoiesis yang disebabkan oleh pemberian rhEPO pada kuda dan telah memberikan bukti yang mendukung pengendalian penyalahgunaan ESA dengan memantau transkriptom darah kuda.